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      對電泳儀的一些誤差來源分析

      點擊次數:1703 更新時間:2022-11-25
         電泳是指帶電荷的溶質或粒子在電場中向著與其本身所帶電荷相反的電極移動的現象。利用電泳現象將多組分物質分離、分析的技術叫做電泳技術??梢詫崿F電泳分離技術的儀器稱之為電泳儀。
        凝膠電泳是分子生物學中用于DNA分析的主要方法之一。此方法涉及DNA片段通過凝膠的遷移,在凝膠中它們根據大小或形狀分開。但是,即使是科學上合理的方法,例如凝膠電泳,也無法避免產生誤差,對于誤差的常見因素如下:
        1.樣品污染
        電泳法的主要應用是在分子生物學中分析DNA的工具,但在法醫學中也用作鑒定違法現場樣本的手段。為了獲得準確的結果,小化此技術中的錯誤來源很重要。錯誤的來源之一是DNA樣品的污染。如果樣品中有外源DNA,則凝膠中的條帶比僅包含純化樣品的凝膠中的帶多。
        2.凝膠、電流和緩沖液問題
        電源穩壓器用于保持凝膠電泳中的電壓穩定。凝膠的濃度也必須正確以避免錯誤。如果濃度太高或太低,碎片將遷移得太慢或太快。這將導致解析不同頻段時出現錯誤。在電泳過程中,必須注意確保電壓穩定。電壓的任何波動都將導致DNA片段不穩定遷移,從而導致條帶讀取錯誤。緩沖溶液還必須具有正確的組成,因為具有錯誤pH或離子濃度的緩沖液會改變DNA片段的形狀,并改變其遷移時間。
        3.正確的可視化
        可視化凝膠中的每個條帶代表一組大小相同的DNA片段。重要的是凝膠必須正確可視化。如果用于可視化樣品的染料或放射性探針的濃度太高,則生成的圖像將非?;靵y,因為殘留碎片也將可視化。如果凝膠濃度太低,將無法可視化。在所有階段都遵循正確的過程后,凝膠電泳儀將得出準確且可以放心使用的結果。
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